在ELISA實(shi)驗中(zhong)我(wo)們經常會碰(peng)到試劑(ji)盒(he)變(bian)質(zhi)的問題，是(shi)什(shen)么原因導致(zhi)了ELISA試劑(ji)盒(he)的變(bian)質(zhi)呢？接下來(lai)我(wo)就和大家說一(yi)說導致(zhi)ELISA試劑(ji)盒(he)變(bian)質(zhi)的原因有哪些。
導(dao)致(zhi)ELISA試劑盒變質的(de)原因主要(yao)分為(wei)七種(zhong)：
1、方法學的(de)影響
ELISA測定模式包括以(yi)下幾(ji)種：雙抗體夾(jia)(jia)心法(fa)(fa)(fa)(fa)、間接法(fa)(fa)(fa)(fa)、雙抗原夾(jia)(jia)心法(fa)(fa)(fa)(fa)、IgM抗體捕捉法(fa)(fa)(fa)(fa)、競(jing)爭(zheng)抑制(zhi)法(fa)(fa)(fa)(fa)，其中競(jing)爭(zheng)抑制(zhi)法(fa)(fa)(fa)(fa)(HBeAb,HBcAb等采(cai)用)因受操作時差所(suo)引起的不公平競(jing)爭(zheng)等因素(su)的影(ying)響(xiang)，結果重復性(xing)較差，質量(liang)較難(nan)控制(zhi)。
2、試劑因素
不同批次(ci)的(de)ELISA試(shi)(shi)劑(ji)在(zai)制作(zuo)過程中(zhong)很難bao證質量一(yi)致(zhi)，即使(shi)是通過批檢的(de)項(xiang)目(mu)其(qi)檢測結果(guo)也(ye)會存在(zai)差異(yi)，因此必須選擇和訂購長批號的(de)試(shi)(shi)劑(ji)，并bao證保存條件。 嚴(yan)格執行這一(yi)標準可(ke)以避免因試(shi)(shi)劑(ji)批號改(gai)變而重(zhong)新(xin)(xin)建立質控體系及重(zhong)新(xin)(xin)評估試(shi)(shi)劑(ji)的(de)復雜過程，并且能夠bao證結果(guo)的(de)穩定性；對于效(xiao)期(qi)短、使(shi)用率低的(de)試(shi)(shi)劑(ji)，應當小(xiao)量分裝，每次(ci)使(shi)用則(ze)取分裝部(bu)分即可(ke)，避免反復凍融造成(cheng)試(shi)(shi)劑(ji)的(de)失(shi)效(xiao)。
3、樣本(ben)因素
標(biao)本干擾(rao)因(yin)(yin)素(su)包(bao)括內(nei)源性干擾(rao)因(yin)(yin)素(su)和外源性干擾(rao)因(yin)(yin)素(su)，者包(bao)括類(lei)風濕因(yin)(yin)子、補體(ti)、異嗜(shi)性抗(kang)(kang)體(ti)、自身抗(kang)(kang)體(ti)、溶菌(jun)(jun)酶等，后者包(bao)括標(biao)本溶血、標(biao)本被細菌(jun)(jun)污染、標(biao)本貯存時間過長、標(biao)本凝固不(bu)全、冷凍標(biao)本的反(fan)復凍融等。
4、操作因(yin)素
; ELISA操(cao)作步(bu)驟復雜，操(cao)作不當將引(yin)起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯(xian)色、比色。
5、灰(hui)區的設置
通(tong)常情況下，ELISA定性(xing)實(shi)驗以“陽性(xing)”和“陰性(xing)”來報告結果，兩者間(jian)有一條分界線(xian)被稱為“陽性(xing)判斷(duan)值(zhi)(zhi)”(cut-off value，CO值(zhi)(zhi))，這是(shi)定性(xing)免疫(yi)測定結果報告的(de)依據。
6、標本復查
ELISA手工檢測(ce)過程(cheng)復雜，影響(xiang)因素較多，即(ji)使(shi)室內質控在控，也可能(neng)因孔間差(cha)異而造成結果(guo)的(de)差(cha)異，因此加大復查力度(du)是bao證結果(guo)準確性(xing)的(de)可靠方法(fa)。
7、表示結果的常用方法
① 定性測定。
② 半定量測定，結果一般(ban)以滴(di)度(du)表示(shi)。
③ 定(ding)量(liang)(liang)(liang)測定(ding)，即用已知量(liang)(liang)(liang)的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定(ding)，繪(hui)制標準曲線(xian)，結果(guo)以量(liang)(liang)(liang)或單位表示。在ELISA定(ding)量(liang)(liang)(liang)檢(jian)測中每一塊反應(ying)板都必須(xu)繪(hui)制相應(ying)的標準曲線(xian)。
以上七種導致變(bian)質的情(qing)況(kuang)我們只要多加注意(yi)，ELISA試劑(ji)盒變(bian)質的原因基本上也就不會存在了。
原創作者：上(shang)海恒遠(yuan)生物(wu)科技(ji)有限公司
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