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恒遠生物|如何鑒定微生物

點擊(ji)次數:7278   發布時間:2023/8/30 15:21:17

    微生物(wu)是對藥品原料、生產(chan)(chan)環境和成(cheng)品造(zao)成(cheng)污染(ran)的(de)重要因素(su),也是造(zao)成(cheng)生產(chan)(chan)失敗、成(cheng)品不合格、對人(ren)類造(zao)成(cheng)危害的(de)重要因素(su)。所以分(fen)離得到的(de)污染(ran)微生物(wu),進行微生物(wu)鑒(jian)定,是十(shi)分(fen)必要的(de),也可為檢驗和生產(chan)(chan)提供有(you)效的(de)依據。

1、形態學特征
(1)細胞形態
    在顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)外(wai)形大小(xiao)、形狀、排列等,細(xi)胞(bao)構造,革蘭(lan)氏染色(se)反(fan)應,能否運動、鞭毛著生部位(wei)(wei)和數目(mu),有無芽孢和莢膜、芽孢的大小(xiao)和位(wei)(wei)置,放線菌和真菌的繁殖器官(guan)的形狀、構造,孢子的數目(mu)、形狀、大小(xiao)、顏(yan)色(se)和表面(mian)特征等。

(2)群體(ti)形(xing)態
通常是(shi)指以(yi)下情況的特(te)征:
1)在一定的固體(ti)培(pei)養基上(shang)生(sheng)長的菌落特(te)征:包括外形、大小、光澤、黏稠度、透明度、邊緣、隆起情(qing)況、正反(fan)面顏(yan)色、質地(di)、氣(qi)味、是否分(fen)泌(mi)水溶性色素等。
2)在(zai)一定的(de)斜面(mian)培養基上生長的(de)菌苔(tai)特征(zheng):包括生長程度、形狀、邊緣、隆起、顏色等;在(zai)半固體培養基上經穿刺接種后的(de)生長情況。
3)在液體培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中生長情況(kuang):包括是否產生菌(jun)膜,均勻(yun)渾濁還(huan)(huan)是發生沉淀,有無氣(qi)泡(pao),培(pei)養(yang)(yang)基(ji)的(de)顏色(se)等。如(ru)是酵母(mu)菌(jun),還(huan)(huan)要注意是成(cheng)醭狀、環狀還(huan)(huan)是島(dao)狀。

2、生理生化反(fan)應特征
(1)利(li)用物質的能力
包括對各種碳源(yuan)利用(yong)(yong)(yong)的能力(li)(能否(fou)以CO2為唯1碳源(yuan)、各種糖類的利用(yong)(yong)(yong)情況等(deng))、對各種氮(dan)源(yuan)的利用(yong)(yong)(yong)能力(li)(能否(fou)固氮(dan)、硝(xiao)酸鹽和銨(an)鹽利用(yong)(yong)(yong)情況等(deng))、能源(yuan)的要(yao)求(光能還是化(hua)能、氧(yang)化(hua)無機(ji)物(wu)還是氧(yang)化(hua)有機(ji)物(wu)等(deng))、對生長因(yin)子的要(yao)求(是否(fou)需(xu)要(yao)生長因(yin)子以及需(xu)要(yao)什么生長因(yin)子等(deng))。
(2)代謝產物的特殊(shu)性(xing)
這(zhe)方面的鑒定(ding)項(xiang)目非常多,如(ru)是否(fou)產生H2S、吲哚、CO2、醇、有機酸,能(neng)否(fou)還原硝酸鹽,能(neng)否(fou)使牛奶凝固、凍化(hua)等。
(3)與溫度和氧(yang)氣(qi)的關(guan)系(xi)
測出適合某種微(wei)(wei)生物生長(chang)的溫(wen)(wen)度(du)范圍以及(ji)它的適生長(chang)溫(wen)(wen)度(du)、zui低(di)生長(chang)溫(wen)(wen)度(du)和zui高生長(chang)溫(wen)(wen)度(du)。對氧(yang)氣(qi)的關系,看它是(shi)否為好氧(yang)、微(wei)(wei)量好氧(yang)、兼性(xing)好氧(yang)、耐氧(yang)還是(shi)性(xing)厭氧(yang)。

3、生態學(xue)特征
    生態學特征主(zhu)要包(bao)括(kuo)它與其他生物之間的關系(是寄生還是共生,寄主(zhu)范圍以及致病(bing)的情況)。在自然界的分布情況(pH情況、水分程(cheng)度等)、滲透壓情況(是否耐高滲、是否有嗜鹽(yan)性等)。

4、血清(qing)學(xue)反應
    很多細菌(jun)(jun)有(you)十分相似(si)的(de)外表結構(gou)或有(you)作用(yong)相同的(de)酶(如(ru)(ru)乳(ru)酸桿菌(jun)(jun)屬內各種(zhong)細菌(jun)(jun)都有(you)乳(ru)酸脫(tuo)氫酶)。雖然它們(men)的(de)蛋白質分子結構(gou)各異,但在(zai)普通技術下(如(ru)(ru)電子顯微(wei)鏡或生化反應(ying)),仍無法分辨它們(men)。然而利用(yong)抗原與抗體的(de)高度敏(min)感特異性(xing)反應(ying),就可用(yong)來(lai)鑒(jian)定(ding)(ding)相似(si)的(de)菌(jun)(jun)種(zhong),或對同種(zhong)微(wei)生物(wu)分型。用(yong)已知菌(jun)(jun)種(zhong)、型或菌(jun)(jun)株(zhu)制成的(de)抗血(xue)清,與待鑒(jian)定(ding)(ding)的(de)對象是(shi)否發生特異性(xing)的(de)血(xue)清學(xue)反應(ying)來(lai)鑒(jian)定(ding)(ding)未知菌(jun)(jun)種(zhong)型或菌(jun)(jun)株(zhu)。該法常(chang)用(yong)于(yu)腸道菌(jun)(jun)、噬菌(jun)(jun)體和病(bing)毒的(de)分類鑒(jian)定(ding)(ding)。利用(yong)此(ci)法,已將傷寒桿菌(jun)(jun)、肺炎鏈球菌(jun)(jun)等(deng)菌(jun)(jun)分成數十種(zhong)菌(jun)(jun)型。

5、生活史
    生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物的(de)(de)個(ge)體在一生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)的(de)(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長繁殖過程(cheng)中,經過不(bu)同(tong)的(de)(de)發育階段。這種過程(cheng)對特定的(de)(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物來(lai)講是重復循環的(de)(de),常稱為(wei)該種生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物的(de)(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)活(huo)周期或生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)活(huo)史。各種生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物都有自己的(de)(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)活(huo)史。在分類鑒定中,生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)活(huo)史有時也是一項指標(biao),如黏(nian)細菌就是以它的(de)(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)活(huo)史作為(wei)分類鑒定的(de)(de)依據。

6、對噬菌體的(de)敏(min)感性
    與(yu)血(xue)清學反應相(xiang)(xiang)似,各(ge)種(zhong)噬(shi)菌體(ti)有其嚴格的(de)(de)宿主范圍(wei)。利用這一特(te)性,可以(yi)用某(mou)一已知的(de)(de)特(te)異性噬(shi)菌體(ti)鑒定其相(xiang)(xiang)應的(de)(de)宿主。

7、細胞壁組分(fen)分(fen)析(xi)
    細胞壁(bi)(bi)(bi)組(zu)分(fen)分(fen)析先應(ying)用于放線(xian)菌分(fen)類(lei)中,把它作為區分(fen)“屬(shu)”的(de)(de)(de)依(yi)據。近年來(lai),有人對18個(ge)(ge)屬(shu)的(de)(de)(de)放線(xian)菌的(de)(de)(de)細胞壁(bi)(bi)(bi)進行(xing)了分(fen)析,根據細胞壁(bi)(bi)(bi)的(de)(de)(de)氨基(ji)酸組(zu)成,將其(qi)分(fen)為6個(ge)(ge)細胞壁(bi)(bi)(bi)類(lei)型,又根據細胞壁(bi)(bi)(bi)的(de)(de)(de)糖的(de)(de)(de)組(zu)成分(fen)成4個(ge)(ge)糖類(lei)型,在此基(ji)礎上,結(jie)合形(xing)態特征提出了相(xiang)應(ying)的(de)(de)(de)科屬(shu)檢索表。

8、紅外(wai)光譜(pu)
    一(yi)(yi)般認為,每種(zhong)物質的(de)化學結構都有特定(ding)的(de)紅(hong)外光譜,若兩個樣品的(de)吸(xi)收光譜wan全相同,可以初步認為它們是同一(yi)(yi)種(zhong)物質。因此,紅(hong)外光譜技術被應用(yong)(yong)到微(wei)生物的(de)分類(lei)(lei)中(zhong)。它先(xian)后對(dui)芽(ya)孢(bao)桿菌(jun)(jun)、乳酸菌(jun)(jun)、大(da)腸桿菌(jun)(jun)、酵母(mu)菌(jun)(jun)進行分類(lei)(lei),近年來又應用(yong)(yong)于放線菌(jun)(jun)分類(lei)(lei)中(zhong)。
    根據(ju)有(you)關學者的(de)試驗表明(ming),這種方(fang)法(fa)簡(jian)便快速,樣品少,結(jie)果(guo)較好(hao),不(bu)僅可以(yi)初步(bu)了解各(ge)屬菌的(de)細胞成分的(de)化學性質,同(tong)時也(ye)有(you)助(zhu)于微生(sheng)物(wu)間系統發育(yu)關系的(de)探索。它也(ye)有(you)不(bu)足之處(chu),借助(zhu)于紅外線光譜區(qu)分屬內(nei)的(de)種和菌株(zhu)是(shi)困難(nan)的(de),可以(yi)作為“屬”的(de)分類特(te)征。

原創作者:上海恒(heng)遠生物科技有限公司

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