血(xue)清：指血(xue)液凝固(gu)后，在血(xue)漿中除去纖維(wei)蛋白原分離出的(de)淡(dan)黃色透(tou)明(ming)液體或(huo)指纖維(wei)蛋白原已被除去的(de)血(xue)漿。主要作用是提供(gong)基本營養物質、提供(gong)激素和各(ge)種(zhong)生長因子、提供(gong)結合蛋白、提供(gong)促接(jie)觸和伸展因子使細胞貼壁免(mian)受機械損傷、對培(pei)養中的(de)細胞的(de)起到某些保護(hu)作用。
用于細胞培養的(de)(de)胎牛(niu)血(xue)清以及其它(ta)血(xue)清中可能存在(zai)的(de)(de)沉淀(dian)物有以下三種:
1.纖(xian)維蛋白：它是經常出(chu)現的(de)較大的(de)沉淀物(wu)，可(ke)以達到1-2mm，肉眼可(ke)觀。因(yin)為血(xue)清都(dou)是在(zai)(zai)低溫下進行收(shou)集和(he)快速處(chu)理的(de)，一些(xie)纖(xian)維蛋白原（可(ke)溶性的(de)形成絮狀纖(xian)維蛋白的(de)體）在(zai)(zai)處(chu)理過(guo)程中仍然處(chu)于溶解狀態(tai)，當經過(guo)過(guo)濾分裝后，就(jiu)會(hui)在(zai)(zai)瓶中凝結出(chu)現纖(xian)維蛋白沉淀。
2.膽固醇(chun)、脂(zhi)肪(fang)酸酯以及一些(xie)蛋(dan)白(bai)質(zhi)。他們(men)也是血清中出現(xian)沉淀物(wu)的常見(jian)原(yuan)因。
3.磷酸鈣：也(ye)是(shi)常(chang)見的(de)一種沉淀物，通常(chang)會使血清出現(xian)渾濁(zhuo)的(de)現(xian)象，并且(qie)在(zai)37℃培養的(de)時候會增加。這種沉淀物在(zai)倒置顯(xian)微鏡下觀(guan)察像小(xiao)黑(hei)點，這些小(xiao)黑(hei)點由于布朗運動看上(shang)去可以活動，因此經常(chang)被誤(wu)認為是(shi)微生物污染(ran)。
影(ying)響(xiang)：
1.血清(qing)(qing)(qing)中(zhong)出現大量的(de)(de)(de)(de)沉淀物，血清(qing)(qing)(qing)將(jiang)很(hen)難過(guo)濾(lv)。一般說來，在血清(qing)(qing)(qing)生產(chan)后(hou)已經(jing)經(jing)過(guo)100nm或者(zhe)40nm的(de)(de)(de)(de)過(guo)濾(lv)處(chu)理(li)，并經(jing)過(guo)嚴格的(de)(de)(de)(de)無(wu)菌檢測，因(yin)此不(bu)推薦再(zai)次過(guo)濾(lv)用于細(xi)胞培(pei)養的(de)(de)(de)(de)血清(qing)(qing)(qing)。可以在大規模的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞培(pei)養中(zhong)將(jiang)血清(qing)(qing)(qing)直接加到培(pei)養基(ji)中(zhong)一起過(guo)濾(lv)。
3、污染，磷酸鈣往往被誤認(ren)為是(shi)微生(sheng)物污染，研究者(zhe)可(ke)能會在血(xue)清(qing)(qing)中(zhong)觀(guan)察(cha)到(dao)一(yi)些絮狀的沉(chen)淀(dian)，就(jiu)會去做(zuo)無(wu)菌試驗，將(jiang)血(xue)清(qing)(qing)放(fang)在培養箱中(zhong)培養幾天，結(jie)果(guo)可(ke)能會觀(guan)察(cha)到(dao)更多(duo)的絮狀沉(chen)淀(dian)，因此就(jiu)斷定血(xue)清(qing)(qing)被污染了。我們(men)建議不(bu)要直接(jie)將(jiang)血(xue)清(qing)(qing)放(fang)在培養箱中(zhong)培養觀(guan)察(cha)是(shi)否(fou)(fou)有(you)(you)菌，而(er)是(shi)將(jiang)血(xue)清(qing)(qing)加到(dao)瓊脂板上進(jin)行培養以(yi)(yi)觀(guan)察(cha)是(shi)否(fou)(fou)有(you)(you)細菌生(sheng)長。另外，也可(ke)以(yi)(yi)進(jin)行革蘭氏染色，在油鏡下觀(guan)察(cha)，以(yi)(yi)確認(ren)是(shi)否(fou)(fou)有(you)(you)污染。
避免血清沉積發作(zuo)的辦法：
a）凍結血清時，請隨(sui)時將之(zhi)搖晃均勻，使(shi)溫度及成分均一，削減沉積的發作。
b）血(xue)清分(fen)裝凍(dong)存時，須(xu)規矩搖晃均勻（當心勿(wu)形成氣泡），使溫度與(yu)成分(fen)均一。
c）勿直接由-20℃直接至37℃凍結，因溫度改(gai)變(bian)太大(da)，簡單形成蛋白質(zhi)凝(ning)結而發作沉(chen)積。
d）勿將血清(qing)置于(yu)37℃太久，不(bu)然(ran)血清(qing)會(hui)變得污濁(zhuo)，一起血清(qing)中許多較不(bu)穩定的(de)成份也會(hui)因此受到破壞，然(ran)后影響血清(qing)的(de)質量。
e）血(xue)清的熱滅活(huo)十分簡單形(xing)成沉(chen)積物(wu)的增多(duo)，若非(fei)必要，能夠無須做此(ci)過程(cheng)。
f）若有必(bi)要做血清的熱滅(mie)活，請遵(zun)守56℃，30分(fen)鐘(zhong)的準則，而且隨時搖晃(huang)均勻，溫度過(guo)高，時刻過(guo)久或搖晃(huang)不均勻，都會形成沉積物的增(zeng)多。
原創作者(zhe)：上(shang)海恒遠(yuan)生物科(ke)技有限(xian)公司(si)
總訪(fang)問量：7389377 