有(you)很多客(ke)戶向我們咨詢(xun)ELISA實驗(yan)后如(ru)何進行(xing)曲線制作(zuo)？對于那(nei)么(me)多的曲線計算公(gong)式，我們該(gai)如(ru)何選擇合適的擬合方程呢？恒(heng)遠生物小(xiao)編給(gei)大家總結(jie)：ELISA曲線擬合的那(nei)些事。
我們一般可以用軟件繪制(zhi)也可以通過excel進(jin)行(xing)制(zhi)作。按照科學分(fen)析方法，如果存在(zai)奇異點或者污點，直接(jie)采用線(xian)(xian)性分(fen)析不是很好，要(yao)對擬合(he)曲線(xian)(xian)的幾個點進(jin)行(xing)取舍，同時也可以改用雙對數(shu)直線(xian)(xian)擬合(he)或者四參數(shu)曲線(xian)(xian)擬合(he)。
那么(me)常(chang)用的(de)曲(qu)線(xian)擬合回(hui)歸方程主要為以下幾種(zhong)：
直(zhi)線回歸：直線(xian)(xian)(xian)回(hui)(hui)歸(gui)(gui)是簡單的(de)(de)(de)回(hui)(hui)歸(gui)(gui)模型,也是基本的(de)(de)(de)曲線(xian)(xian)(xian)擬(ni)(ni)合(he)回(hui)(hui)歸(gui)(gui)分(fen)析方法，將所(suo)有(you)的(de)(de)(de)測試點擬(ni)(ni)合(he)為一條(tiao)直線(xian)(xian)(xian)，其擬(ni)(ni)合(he)函數方程式為：y=a+bx。但是因為實(shi)(shi)際實(shi)(shi)驗中線(xian)(xian)(xian)性(xing)好的(de)(de)(de)情況下可(ke)能直線(xian)(xian)(xian)回(hui)(hui)歸(gui)(gui)可(ke)以獲(huo)得(de)較(jiao)為理(li)(li)想(xiang)的(de)(de)(de)R2值。那么如(ru)果直線(xian)(xian)(xian)線(xian)(xian)(xian)性(xing)不理(li)(li)想(xiang)的(de)(de)(de)情況下如(ru)何擬(ni)(ni)合(he)？作為擁有(you)十多(duo)年(nian)ELISA產品(pin)生產經(jing)驗的(de)(de)(de)企(qi)業，我們會推薦用戶進行多(duo)項式擬(ni)(ni)合(he)來(lai)改善直線(xian)(xian)(xian)回(hui)(hui)歸(gui)(gui)線(xian)(xian)(xian)性(xing)不理(li)(li)想(xiang)的(de)(de)(de)問題。
第二種(zhong)二次多(duo)項式擬合回(hui)歸方程：二次多(duo)項式(shi)成拋物線狀(zhuang)，開(kai)口(kou)向下或(huo)者(zhe)(zhe)向上，在很多(duo)ELISA實驗中(zhong)，擬合(he)近似于二次多(duo)項式(shi)的(de)升段(duan)或(huo)者(zhe)(zhe)降段(duan)，所以使用二次多(duo)項式(shi)擬合(he)時，取值的(de)范圍都落(luo)在曲線的(de)升段(duan)或(huo)者(zhe)(zhe)降段(duan)。其擬合(he)函數方程式(shi)為：y=ax2+bx+c
第(di)三種對數擬合回歸(gui)方(fang)程：我們將標(biao)準(zhun)品的O.D測值(zhi)設(she)為(wei)x軸，標(biao)準(zhun)品濃度的對數作為(wei)y軸，濃度是自變(bian)量，O.D.值(zhi)是因變(bian)量進行曲(qu)線(xian)擬(ni)合。
第(di)四種(zhong)是四參數擬合回歸方程：競爭(zheng)法和夾心法都可(ke)(ke)以用到。它(ta)的(de)(de)形(xing)狀,根據(ju)情(qing)況(kuang),可(ke)(ke)能是一個(ge)單調上升的(de)(de)類似指數,對數,或雙曲(qu)線(xian)的(de)(de)曲(qu)線(xian),也可(ke)(ke)能是一個(ge)單調下降的(de)(de)上述曲(qu)線(xian),還(huan)可(ke)(ke)以是一條S形(xing)曲(qu)線(xian)。它(ta)要求X值不能小于0(因(yin)為指數是實數,故有此(ci)要求)。在很(hen)多情(qing)況(kuang)下它(ta)都可(ke)(ke)以擬合ELISA的(de)(de)反(fan)應曲(qu)線(xian),所以它(ta)也成了(le)ELISA中應用廣(guang)的(de)(de)模型。
曲(qu)線擬合方法(fa)雖多，要根據(ju)不同(tong)類型ELISA本身的(de)特點，選(xuan)擇(ze)適(shi)合的(de)曲(qu)線擬合模型，才能(neng)得(de)到合理(li)的(de)實驗結(jie)果。一般情況下(xia)，需(xu)要綜合考慮標準曲(qu)線的(de)趨勢(shi)走向(xiang)以及R值的(de)大(da)小以及樣本落值情況。
利用(yong)Excel四步輕松(song)搞定 ELISA標準(zhun)曲線的(de)制作！
一步：在Excel表(biao)格中輸入濃度(du)和OD值
第 二 步：粘(zhan)貼(tie)”數字部分貼(tie)入(ru)ELISA Calc
第 三(san) 步(bu)：選擇回(hui)歸/擬合模(mo)型
第 四(si) 步：由 Y 計算(suan) Ｘ
上海恒遠生(sheng)物科技有限公司擁有自己的實(shi)驗(yan)室，備有業(ye)的技術(shu)(shu)研發(fa)團(tuan)隊，對各種生(sheng)物試(shi)劑，細胞，血清，ELISA試(shi)劑盒的研發(fa)與銷售(shou)，實(shi)驗(yan)提供免費代測(ce)服務，并提供精湛的技術(shu)(shu)服務，如(ru)果您有實(shi)驗(yan)上的問題歡迎來咨詢，為您提供業(ye)的一對一技術(shu)(shu)指導。
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