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操作(zuo)步驟(zou)：

1.   使(shi)(shi)用(yong)前，將所(suo)有試劑充分混勻。不要使(shi)(shi)液體(ti)產生(sheng)大(da)量的泡(pao)沫，以免加(jia)樣時加(jia)入大(da)量的氣泡(pao)，產生(sheng)加(jia)樣上的誤差(cha)。

2.   根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

3.   加入稀釋好后(hou)的標(biao)準品(pin)50ul于反應孔、加入待測樣品(pin)50ul于反應孔內。立即加(jia)入50ul的生物素標記的抗體(ti)。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。

4.   甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6.   甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7.   每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。

8.   取出酶(mei)標板，迅速(su)加入50ul終(zhong)止液，加入終(zhong)止液后應立即測定結果。

9.   在450nm波長(chang)處(chu)測定(ding)各孔的OD值。

結(jie) 果 判 斷 與 分 析：

1、  儀器值(zhi)：于波長450nm的(de)酶標儀(yi)上(shang)讀取(qu)各孔的(de)OD值

2、  以吸(xi)光度(du)OD值為縱坐標（Y），相(xiang)應的(de)S-100B標(biao)準品濃度為橫坐標(biao)（X），做得(de)相(xiang)應的(de)曲線，樣品的(de)S-100B含(han)量(liang)可(ke)根據其OD值由標準(zhun)曲線換算出相應的濃度，再乘以稀釋倍數；或用(yong)標準(zhun)物(wu)的濃度與OD值計(ji)算出標(biao)準曲(qu)線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程(cheng)式，計算出樣(yang)品濃(nong)(nong)度，再乘以稀釋(shi)倍(bei)數，即為(wei)樣(yang)品的實際濃(nong)(nong)度。

3、  檢測值范圍(wei)： 0-200ng/ml

4、  敏(min)感度：1.0ng/ml

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更新時間(jian)：2024/4/26 9:09:01