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試(shi)劑盒組(zu)成
1 | 30倍(bei)濃縮洗(xi)滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶(mei)標試劑 | 6ml×1瓶(ping) | 8 | 標準品(8000 nmol/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包(bao)被板(ban) | 12孔×8條 | 9 | 標準品(pin)稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣(yang)品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書(shu) | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶(ping) | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
ELISA測定(ding)中(zhong)影響(xiang)因素(su)較多,而且其操作中(zhong)有(you)一(yi)(yi)定(ding)的技(ji)術要求,在(zai)臨床檢驗中(zhong)除(chu)正常(chang)(chang)反應外,有(you)時(shi)常(chang)(chang)可見到一(yi)(yi)些錯誤結(jie)果(guo)(即假陽性或假陰性)如(ru)標本(ben)的影響(xiang),對這一(yi)(yi)方面上海恒遠(yuan)生物(wu)來為大家(jia)細(xi)細(xi)解(jie)讀:
1. 溶血標本(ben)及混有紅(hong)細胞(bao)的血清采用(yong)ELISA法檢測易產生假陽(yang)性。可(ke)(ke)能是溶血血清中含有過(guo)氧化(hua)酶(mei)物質(紅細(xi)胞或血紅蛋白中的(de)亞鐵血紅素(su)),在洗滌過(guo)程中往(wang)往(wang)難以(yi)完全洗脫,它可(ke)(ke)使H2O2釋(shi)放出(chu)原生態(tai)氧(yang)(O),從而催化底物四甲基聯苯胺生(sheng)成可溶性的有(you)色物質,即(ji)顯藍(lan)色,產生(sheng)假陽性。所以嚴重溶血標本禁用。
2. 標本(ben)受細菌污染(ran)。因(yin)菌體中可(ke)(ke)能含有(you)內源性(xing)辣根過氧化物酶,因(yin)此,被(bei)細菌污染(ran)的標本(ben)同溶血標本(ben)一(yi)樣,亦可(ke)(ke)產生(sheng)非特異性(xing)顯色(se)而(er)干擾測定結果。
3. 標本(ben)保存不當。在(zai)(zai)冰(bing)箱中(zhong)保存過(guo)久的標本(ben),在(zai)(zai)間接法ELISA測定中(zhong)會導致(zhi)本(ben)底過(guo)深、造成假陽性;為克服(fu)上述干(gan)擾,ELISA試劑(ji)盒測(ce)定的血(xue)清標本宜(yi)為新鮮采(cai)集(ji);如不(bu)能立即(ji)測(ce)定,5 d內測定的血清標本可存(cun)放于(yu)4℃,1周(zhou)后(hou)測定的血清標本(ben)應(ying)低溫凍(dong)存;凍(dong)存后(hou)融解的標本(ben),蛋白質局部(bu)濃縮,分布不均,應(ying)充分混合后(hou)再測定,但混勻(yun)時應(ying)輕柔,不可(ke)強(qiang)烈(lie)振(zhen)蕩。
“豚鼠血纖蛋白原ELISA試劑盒”優勢介紹:
1.手(shou)續(xu)(xu)簡單:無需單證,貨物發到我(wo)司(si)倉庫后,手(shou)續(xu)(xu)全部有我(wo)們辦理。
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試劑的準備(bei)
1. 標(biao)(biao)準(zhun)品(pin):標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)的系列稀(xi)釋應在實驗(yan)時準(zhun)備(bei),不能儲存。稀(xi)釋前(qian)將標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)振(zhen)蕩混勻。稀(xi)釋比(bi)例按下表中(zhong)進行:
400 pg/ml | (6號標準品) | 原倍濃(nong)度不用稀釋直接加(jia)入50ul |
200 pg/ml | (5號標準品) | 100ul的原倍標準品(pin)加入100ul的(de)標準(zhun)品稀(xi)釋液 |
100 pg/ml | (4號標準(zhun)品) | 100ul的(de)5號標準品加入(ru)100ul的標(biao)準品稀釋(shi)液 |
50 pg/ml | (3號標準品) | 100ul的4號標(biao)準(zhun)品加入100ul的標準品稀(xi)釋液 |
25 pg/ml | (2號(hao)標準(zhun)品) | 100ul的3號標準品加(jia)入100ul的標準品稀(xi)釋(shi)液 |
12.5 pg/ml | (1號標準(zhun)品) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品(pin)稀釋(shi)液(ye) |
0 pg/ml | (空白對(dui)照) | 原倍(bei)濃(nong)度(du)不用(yong)稀釋(shi)直接加入50ul |
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸(zheng)餾(liu)水50倍(bei)稀釋。
ELISA浸(jin)泡式洗滌(di):
1. 吸干或甩干孔(kong)內(nei)反應液;
2. 用洗(xi)滌液過洗(xi)一遍(將洗(xi)滌液注滿板孔后(hou),即(ji)甩去);
3. 浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分(fen)鐘,間(jian)歇搖動,浸泡時間(jian)不可隨意縮短;
4. 吸干(gan)孔內(nei)液體(ti)。吸干(gan)應(ying)徹底,可(ke)用水泵(beng)或真空(kong)泵(beng)抽吸,也可(ke)甩(shuai)去液體(ti)后(hou)在清潔(jie)毛巾或吸水紙上拍干(gan);
5. 重復(fu)操作c和d,洗(xi)滌3-4次(或按說明規定)。在(zai)間(jian)接法中(zhong)如本底較高,可增加(jia)洗滌次數或(huo)延長(chang)浸泡時(shi)間(jian)。
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更新時間(jian):2024/4/29 9:44:07
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