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運(yun)輸(shu)條件:低(di)溫運(yun)輸(shu),用干(gan)冰或(huo)者冰袋低(di)溫運(yun)輸(shu)。
試劑盒組(zu)成(cheng)
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶(ping) |
2 | 酶(mei)標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品(pin)(8000 nmol/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶(mei)標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品(pin)稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣(yang)品稀(xi)釋液 | 6ml×1瓶(ping) | 10 | 說(shuo)明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶(ping) | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密(mi)封袋(dai) | 1個 |
ELISA測(ce)定中(zhong)(zhong)影響(xiang)因(yin)素較多,而且其(qi)操作中(zhong)(zhong)有(you)一定的技(ji)術(shu)要求,在臨(lin)床(chuang)檢驗中(zhong)(zhong)除正(zheng)常(chang)反應(ying)外,有(you)時常(chang)可見到一些錯誤結(jie)果(即(ji)假(jia)陽性(xing)或假(jia)陰性(xing))如(ru)標(biao)本(ben)的影響(xiang),對這一方面上海(hai)恒遠(yuan)生物來為大家細細解讀:
1. 溶(rong)血(xue)標本及(ji)混(hun)有紅(hong)細胞(bao)的血(xue)清(qing)采(cai)用ELISA法檢測易產生假陽性。可能是溶血(xue)血(xue)清中含有過(guo)(guo)氧化酶物質(紅細胞(bao)或血(xue)紅蛋白中的亞鐵血(xue)紅素),在洗滌過(guo)(guo)程中往(wang)往(wang)難以(yi)完(wan)全洗脫,它可使(shi)H2O2釋放出原生態氧(O),從而催化(hua)底物(wu)四(si)甲基聯(lian)苯胺生(sheng)成可溶性的有色物(wu)質,即顯藍色,產生(sheng)假陽性。所以嚴(yan)重溶血標本(ben)禁用。
2. 標本受細(xi)菌污(wu)染(ran)。因(yin)菌體中可(ke)(ke)能含(han)有內(nei)源(yuan)性(xing)辣根過氧化物酶,因(yin)此,被細(xi)菌污(wu)染(ran)的(de)標本同溶血標本一樣,亦可(ke)(ke)產生非(fei)特異性(xing)顯色(se)而干擾測定(ding)結果。
3. 標本(ben)保存(cun)不當。在冰(bing)箱中保存(cun)過久的標本(ben),在間接法ELISA測定中會導致本底(di)過(guo)深、造成假陽性;為克服(fu)上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內(nei)測定的血清標(biao)本可(ke)存放于4℃,1周后(hou)測定的血清標(biao)本(ben)應(ying)低溫(wen)凍(dong)存;凍(dong)存后(hou)融解的標(biao)本(ben),蛋白質局部濃(nong)縮(suo),分布不均(jun),應(ying)充分混合后(hou)再(zai)測定,但混勻時應(ying)輕柔,不可強(qiang)烈振蕩。
“豚鼠二胺氧化酶ELISA試劑盒”優勢介紹:
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試劑的準備
1. 標準(zhun)品(pin):標準(zhun)品(pin)的系列稀釋應在(zai)實驗時(shi)準(zhun)備,不能儲存(cun)。稀釋前將標準(zhun)品(pin)振蕩混(hun)勻。稀釋比例按(an)下表中(zhong)進行(xing):
400 pg/ml | (6號標準(zhun)品) | 原倍濃(nong)度不用稀釋(shi)直接(jie)加入50ul |
200 pg/ml | (5號標準品) | 100ul的原倍標準品加(jia)入(ru)100ul的(de)標準品(pin)稀釋液 |
100 pg/ml | (4號標準(zhun)品) | 100ul的5號標準品加入100ul的標(biao)準品稀釋液 |
50 pg/ml | (3號標準品(pin)) | 100ul的(de)4號標(biao)準品加入100ul的標準品稀釋液 |
25 pg/ml | (2號標準品) | 100ul的3號標(biao)準品加入100ul的標(biao)準(zhun)品稀釋液 |
12.5 pg/ml | (1號標準品) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀(xi)釋液 |
0 pg/ml | (空白對(dui)照) | 原(yuan)倍濃度不用稀釋直接(jie)加入50ul |
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸(zheng)餾水(shui)50倍(bei)稀(xi)釋。
ELISA浸泡式洗滌:
1. 吸干或(huo)甩干孔內反應液;
2. 用洗(xi)(xi)滌(di)液過洗(xi)(xi)一(yi)遍(將洗滌液注(zhu)滿板孔后,即(ji)甩去);
3. 浸(jin)泡,即將洗滌(di)液注滿板孔,放置(zhi)1-2分鐘(zhong),間歇(xie)搖(yao)動(dong),浸泡時(shi)間不(bu)可隨意縮(suo)短;
4. 吸干(gan)孔內液體(ti)。吸干(gan)應徹底,可用水泵或(huo)真空泵抽吸,也可甩去液體(ti)后在(zai)清潔(jie)毛巾或(huo)吸水紙上拍干(gan);
5. 重復(fu)操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規定)。在間接法中如本(ben)底較高,可增加洗滌次數(shu)或延(yan)長浸泡時間。
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更(geng)新時間:2024/5/14 9:31:48
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